研究基因在代谢通路或某些特定疾病发生过程中的功能,对于疾病机理研究及药物研发具有非常重要的意义。新一代基因编辑技术CRISPR以其操作简单和通用的独特优势,成为开展正向遗传学筛选实验强有力的工具。利用CRISPR技术建立可能与某类功能相关的突变体库,通过功能性筛选和富集、PCR扩增及深度测序分析,确认与这类功能相关的基因。
必威生物利用独创的“GPS”(Genotype,Phenotype,Synotype)平台,提供基于CRISPR sgRNA文库的一站式基因功能筛选服务。我们专利的Syno®合成技术平台,可以快速高效地实现sgRNA文库构建,并包装成慢病毒混合文库后转染细胞。结合高通量/高内涵筛选平台,利用控制细胞存活、结合免疫染色、流式细胞术等手段筛选得到所需细胞,最终通过测序等方法推断出发挥作用的靶基因。
服务项目 | 服务详情 | 周期 |
---|---|---|
sgRNA设计 |
针对特定基因分类进行gRNA序列设计 每个基因设计3-6条sgRNA |
1-2周 |
芯片合成 | 将所设计的所有sgRNA及阴性对照合成在一张芯片上 | 3-4周 |
sgRNA文库构建 | 将sgRNA构建到客户的目标载体上 | 2-3周 |
文库质粒大抽 | 根据发货量进行转染级质粒抽提 | 1周 |
文库质检及NGS验证(可选) |
1. 克隆覆盖倍数必须大于100倍 |
2-3周 |
病毒包装(可选) | 慢病毒包装,病毒滴度: 108TU/ml | 2-3周 |
总计 | 11-16周 |