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Trimer引物合成

Trimer引物是3个核苷按预定种类和顺序连接起来所形成的三联核苷（Trimer phosphoramidites），这些不同的三联核苷与不同的氨基酸的一一对应。必威生物采用一种新的基于密码子水平的Trimer引物合成技术来合成突变引物，一条Trimer引物中可插入多至20个Trimer位点，保证您下游实验筛选的多样性和筛选的便捷性。我们能够根据客户的实际需求提供多种氨基酸定制服务。Trimer引物合成可用于下游文库构建，广泛应用于蛋白定向进化、抗体筛选、药物靶点筛选与药物发现、酶的优化等方面的研究。

服务优势

一条Trimer引物中可插入多至20个Trimer位点
高水准的合成效率和准确度
高覆盖度、高均一性
针对复杂型文库性价比更高

服务详情

Trimer引物长度	一条引物中Trimer位点数	纯化方式	交付周期	交付内容
≤120nt	≤20	PAGE/HPLC	2-6周	• Trimer引物 • COA • NGS测序分析结果

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常见问题

Trimer引物合成过程中需要注意哪些问题

引物长度：

引物长度通常在15～30bp之间，常用的为18～27bp。

不建议引物长度大于38bp，因为过长的引物可能导致与模板DNA的结合能力下降，并且最适延伸温度可能超过Taq DNA聚合酶的最适温度（74℃），从而影响产物的特异性。

GC含量：

G+C含量应在40%～60%之间，以45%～55%为宜。

上下游引物的GC含量应保持接近，以确保Tm值（熔解温度）相近，使得复性条件最佳。

Tm值：

引物所对应模板位置序列的Tm值应在72℃左右，这有助于优化PCR反应条件。

避免自身互补：

引物设计时应避免含有自身互补的碱基序列，以防止引物之间形成二聚体，影响PCR扩增效率。

避免特定结构：

引物设计时应尽量避免出现二硫键或普鲁文结构（如三个或四个相邻的G或C碱基），这些结构可能影响引物的稳定性和PCR扩增效率。

修饰：

在引物的3'端末端，可以引入一些修饰，如磷酸化或5-末端的过氧化磷酸，以提高合成效率和PCR反应的特异性。

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