CRISPR-Cas9技术利用短RNA(gRNA)来引导核酸酶(Cas9)到达DNA靶点。该技术使用简单而且扩展性强，已被广泛应用于实验室研究、生物医学研究、动植物基因工程等领域。包括建立各种遗传修饰的模式生物模型、建立基因调控（如敲除、插入、抑制、激活）细胞系、动植物育种、遗传疾病修复、癌症等重大疾病治疗以及相关药物靶点筛选等。
必威生物提供sgRNA质粒构建服务，针对不同物种（动物、植物等）提供多种质粒构建方案，匹配实验所用材料，提高质粒构建的成功率，为您提供快速、优质的sgRNA载体构建服务。
| 步骤 | 服务内容 | |
|---|---|---|
| 明确物种和载体 | 不同物种不同载体 | |
| 设计靶点 | 一般在不同转录产物的共同外显子上设计3-5个靶点，尽可能破坏重要的domain和所有转录产物isoform。 | |
| 合成 | 合成前确认检测靶点是否存在SNP（如果存在SNP，则不能用T7E1酶检测是否存在突变） | |
| 靶点切割活性检测 | 293T细胞内检测SSA活性 | 酶体外切割活性验证（推荐） |
|
内源活性验证 （有条件选择） |
若目的细胞转染率高，如293T细胞，可转染72h后提基因组，扩增靶序列，T7E1酶切验证，进一步测序验证。 | |
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