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romoter1启动融合在Marker基因C端的目标基因(插在MCS区)的表达;Promoter2启动抗性基因的表达。在细胞中即可瞬时表达,也能稳定表达。
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哺乳动物
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pCMV:EGFP/MCS-pSV40:NeoR
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无
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Promoter1启动融合在Marker基因N端的目标基因(插在MCS区)的表达;Promoter2启动抗性基因的表达。在细胞中即能瞬时表达,也能稳定表达。
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哺乳动物
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pCMV:MCS-EGFP-pSV40:NeoR
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Promoter1为哺乳动物细胞表达启动子,启动目标基因在细胞中表达;T7 promoter可在特定大肠杆菌中启动目标基因在大肠杆菌中表达,同时也可实现目标基因的体外转录;Promoter2启动抗性基因的表达。在细胞中即能瞬时表达,也能稳定表达。
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哺乳动物
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pCMV-pT7:EGFP-pSV40:NeoR
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一个Promoter同时启动目标基因(MCS区插入)和抗性基因的表达;目标基因与抗性基因由ORF linker连接。即可瞬时表达,也可以通过慢病毒感染法实现稳定表达。
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哺乳动物
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pCMV:MCS-IRES-Puro
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慢病毒
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pEF1a:MCS-IRES-Puro
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一个promoter启动目标基因表达(MCS区插入);无真核细胞筛选标记,载体较小,表达量高;只能进行瞬时表达。
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哺乳动物
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pCAGGS:MCS
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T7启动子下的组成型表达,目标蛋白的N端和C端可分别添加0-1个纯化标签;E.Coli筛选抗性可选。
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E.Coli
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pT7:T7 Tag/MCS/6×His;Amp
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pT7:T7 Tag/MCS;Amp
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IPTG诱导促进T7启动子下的诱导表达,在目标蛋白(在MCS区插入)N端可添加1个纯化Tag1;Tag1与目标蛋白之间可插入一个蛋白酶切位点,用于目标蛋白的标签去除。E.Coli筛选抗性可选。
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E.Coli
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pT7lac:His-Thrombin/MCS;Amp
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pT7lac:His-Factor Xa/MCS;Amp
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pT7lac:His-Enterokinas/MCS;Amp
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IPTG诱导促进T7启动子下的诱导表达,在目标蛋白(在MCS区插入)N端可添加1个信号肽,用于蛋白定位;在目标但阿比的C端可添加1个Tag1。E.Coli筛选抗性可选。
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E.Coli
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pT7lac:pelB/MCS/His Tag;Amp
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pT8lac:pelB/MCS/His Tag;KanR
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IPTG诱导促进T7启动子下的诱导表达,目标蛋白的N端和C端可分别添加0-1个纯化标签;E.Coli筛选抗性可选。
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E.Coli
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pT7lac:MCS/His Tag;Amp
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*****
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pT7lac:T7 Tag/MCS/His Tag;Amp
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*****
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pT7lac:T7 Tag/MCS/His Tag;KanR
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IPTG诱导促进T7启动子下的诱导表达;在目标蛋白的N端可添加2个纯化标签;两个标签之间可添加一个蛋白酶切位点,用于标签去除;在C端可添加一个纯化标签。E.Coli筛选抗性可选。
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E.Coli
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pT7lac:6×His-Thrombin site-T7
tag/MCS/6×His;KanR
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*****
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pT7lac:S Tag-Thrombin
site/MCS/6×His;KanR
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pT7lac:6×His-Enterokinase
site/MCS/S Tag;Amp
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IPTG诱导促进T7启动子下的诱导表达;在目标蛋白的N端可添加2个纯化标签;Tag1和Tag2标签之间可添加一个蛋白酶切位点,用于标签去除;Tag2与目标蛋白之间可添加一个蛋白酶切位点;在C端可添加一个纯化标签。E.Coli筛选抗性可选。
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E.Coli
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pT7lac:6×His-Thrombin
site-S tag-Enterokinase
site/MCS/6×His;KanR
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IPTG诱导促进T7启动子下的诱导表达;在目标蛋白的N端可添加3个纯化标签;Tag2和Tag3标签之间可添加一个蛋白酶切位点;Tag3和目标蛋白之间可以添加一个蛋白酶切位点,在C端可添加一个纯化标签。E.Coli筛选抗性可选。
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E.Coli
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pT7lac:TrxA-6×His-Thrombin
site-S Tag-Enterokinase
site-6×His;Amp
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冷处理促进cspA启动子下的诱导表达;在目标蛋白N端可添加1个纯化标签;E.Coli筛选抗性可选。
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E.Coli
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pcspAlac:cspA5’UTR-6×His/MCS/csp3’UTR;Amp
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IPTG诱导促进tac启动子下的诱导表达,在目标蛋白(MCS)的N端可添加1个Tag,Tag和目标蛋白之间可添加1个蛋白酶切位点。
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E.Coli
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ptac:GST-HRV 3C site-MCS;Amp
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ptac:GST-Thrombin site-MCS;Amp
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IPTG诱导促进2个T7启动子分别启动2个基因的诱导表达;第一个表达盒可在目标蛋白(MCS1)N端添加1个Tag,切目标蛋白和MCS1之间可添加一个蛋白酶切位点;第二个表达盒可正在目标蛋白C端添加1个Tag;Ori可选;筛选抗性及启动子可选。
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E.Coli
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pT7lac:8×His-TEV
site/MCS-pT7lac:MCS/S Tag;
pcat:CmR;p15Aori
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*****
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pT7lac:6×His/MCS-pT7lac:MCS/S
Tag;pcat:CmR;p15Aori
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*****
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pT7lac:MCS-pT7lac:MCS/S Tag;
pAmp:KanR;RSF ori
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*****
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pT7lac:MCS-pT7lac:MCS/S Tag;
pAmp:SmR;CloDF13 ori
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*****
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甲醇诱导AOX1启动子下的诱导表达,筛选标记可选。
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毕赤酵母
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pAOX1:a-factor secretion
signal/MCS;Amp/HIS4(KM71、GS115)
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***
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甲醇诱导AOX1启动子下的诱导表达,在目标蛋白(MCS1)前可以添加一个信号肽以介导目标蛋白表达定位,C端可添加2个Tag,且Tag1和Tag2之间有一个MCS区,可以选择性添加;筛选标记可选;诱导稳定性表达。
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毕赤酵母
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pAOX1:a-factor secretion
signal/MCS/Myc-MCS-6×His;Zeocin
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***
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启动子下目标基因的表达;在目标蛋白N端和C端均可以添加1个纯化标签,且N端纯化标签与木匾蛋白之间可添加蛋白酶切位点,用于标签去除。稳定性表达。
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毕赤酵母
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pAOX1:a-factor secretion
signal/MCS/Myc-MCS-6×His;Zeocin
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***
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重组蛋白表达载体
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启动子下目标基因的表达;在目标蛋白N端和C端均可以添加1个纯化标签,且N端纯化标签与木匾蛋白之间可添加蛋白酶切位点,用于标签去除。稳定性表达。
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昆虫细胞
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pPH:6×His-TEV site-MCS/Flag,Amp/GmR
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*****
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咨询
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pPH:6×His-TEV site-MCS,Amp/GmR
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*****
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pPH:MCS,Amp/GmR
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*****
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重组蛋白表达载体
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由2个启动子分别启动2个基因的表达;稳定性表达。
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哺乳动物
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pU6:MCS-CPPT/CTS,Amp/Puro
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*****
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重组蛋白表达载体
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目标启动子启动目标shRNA表达;既可以瞬时表达,也可以稳定表达,可替代慢病毒包装。
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昆虫细胞
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pPH:MCS-pP10:MCS,Amp/GmR
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***
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• 非编码RNA表达载体查看详细
非编码RNA表达载体
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目标启动子启动目标shRNA表达;既可以瞬时表达,也可以稳定表达,可替代慢病毒包装。
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哺乳动物
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pU6:MCS-CPPT/CTS,Amp/Puro
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*****
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• DNA水平下的编辑载体查看详细
DNA编辑载体
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sgRNA与spCas9在同一个质粒载体上表达,分别有2个启动子启动;Screening Marker可选;spCas9可根据物种优化。属于CRISPR spCas9敲除载体,可慢病毒包装。
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哺乳动物
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pU6:sgRNA-pEF1a:Cas9-P2A-Puro;Amp
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*****
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pU6:sgRNA-pEF1a:Cas9-P2A-Blast;Amp
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pU6:sgRNA-pEF1a:Cas9-P2A-GFP;Amp
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pU6:sgRNA-pEF1a:Cas9-P2A-mCherry-T2A-Puro;Amp
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DNA编辑载体
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sgRNA与spCas9在同一个质粒载体上表达,分别有2个启动子启动;Selection Marker可选;spCas9可根据物种优化;属于CRISPR spCas9敲除载体。非病毒包装载体。即可瞬时表达,也可稳定表达。
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哺乳动物
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pU6:sgRNA-pCBh:
Cas9-T2A-Puro;Amp
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*****
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咨询
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pU6:sgRNA-pEF1a:
Cas9-P2A-mCherry-T2A-Puro;Amp
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DNA编辑载体
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sgRNA与saCas9在同一个质粒载体上表达,分别有2个启动子启动;Selection Marker可选;Cas9可根据物种优化。属于CRISPR SaCas9敲除载体,腺病毒包装载体。即可瞬时表达,也可稳定表达。
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哺乳动物
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pCMV:SaCas9-T2A-mCherry-pU6:
sgRNA;Amp
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****
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pCMV:SaCas9-pU6:sgRNA;Ampp
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****
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